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武漢佰樂博生物技術(shù)有限公司
   
     
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噬菌體抗體文庫和噬菌體抗體庫的多樣性

發(fā)表時間:2023-08-30

癌癥等疾病的流行以及對免疫療法需求的增加正在推動針對致病細(xì)胞和生物體的技術(shù)的發(fā)展。這導(dǎo)致了所謂的抗體庫的發(fā)展。從歷史上看,開發(fā)預(yù)防疾病的疫苗和治療方法的主要方法是從感染后幸存下來的人身上收集抗體。免疫細(xì)胞需要分離,并且必須篩選大量抗體,以找到與特定病原體結(jié)合最緊密的抗體。然而,這可能很耗時,有時時間至關(guān)重要——COVID-19大流行一直提醒著我們。


顧名思義,抗體庫是現(xiàn)有抗體的文庫,可以搜索這些庫以提供可能對病原體有效的抗體。通過采用這種方法,可以大大加快藥物發(fā)現(xiàn)過程。通過從幾百人那里收集樣本,抗體庫中可以存儲許多倍的人類抗體。


抗體庫是衍生抗體的重要資源,可用于廣泛的應(yīng)用,從結(jié)構(gòu)和功能研究到細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)干擾研究,再到開發(fā)新的診斷和治療方法。無論目標(biāo)是什么,抗體庫的關(guān)鍵參數(shù)是其復(fù)雜性(也稱為多樣性),即集合中不同元素的數(shù)量,這直接反映了在庫中發(fā)現(xiàn)針對給定抗原的抗體的概率,具有足夠高的親和力。由于抗體庫序列的高度相似性和長度,長期以來,抗體庫復(fù)雜性和質(zhì)量的定量評估一直沒有得到充分解決。復(fù)雜性通常由轉(zhuǎn)化效率推斷,并通過指紋識別和/或?qū)装賯€隨機(jī)文庫元素的測序進(jìn)行測試。


抗體庫中常用的一種技術(shù)是噬菌體展示,其中表面帶有抗體的基因操縱噬菌體與固定化抗原結(jié)合。洗滌后,任何剩余的噬菌體都會顯示感興趣的抗體。然后可以將這些插入大腸桿菌中以擴(kuò)增抗體以進(jìn)行進(jìn)一步研究。


目前世界上有很多的全人源抗體庫,可以分為天然抗體庫,半合成抗體庫和合成抗體庫,不過大部分抗體文庫都存在著供體少、庫容低、多樣性差、親和力弱、錯配率高等問題,普健生物構(gòu)建了千億級別、高親和力全人源重組天然抗體文庫,經(jīng)過驗(yàn)證,任意靶點(diǎn)從文庫中直接篩選,一般可以獲得十幾個到上百個高親和力的克隆,其親和力、特異性都達(dá)到行業(yè)領(lǐng)先水平。

普健生物擁有領(lǐng)先的噬菌體技術(shù)平臺,利用噬菌體展示技術(shù),普健生物提供構(gòu)建噬菌體展示抗體文庫、噬菌體展示多肽文庫、抗原表位篩選、抗體親和力成熟等技術(shù)服務(wù)。同時普健生物具有鼠源天然抗體文庫、兔源天然抗體文庫、納米抗體天然抗體文庫、重組全人源噬菌體抗體文庫等。


普健生物千億級全人重組抗體庫優(yōu)勢:

1.序列正確性高,現(xiàn)階段庫容已達(dá)近千億級別(1011pfu)

2.兩步法建庫,先連入輕鏈再連入重鏈,將來自全世界不同地區(qū)人種來源的輕鏈和重鏈隨機(jī)組合,保證了庫的高質(zhì)量和多樣性。

3.分為κ和λ兩種輕鏈亞型的單鏈抗體庫,與大多數(shù)商業(yè)化混合庫不同,即可用于篩選κ型抗體,也可用于篩選λ型的高親和力抗體。

4.帶有His標(biāo)簽,可直接用phagemid表達(dá)抗體,His標(biāo)簽純化。

QC檢測:

1.總插入率及正確率

片段插入率100%,抗體序列正確率>90%。

2.抗體序列多樣性分析

種系基因(Germline)分析:種系基因主要指單倍體生殖細(xì)胞和干細(xì)胞中所含有,未發(fā)生重排的全部基因??贵w

庫一般只分析抗體序列里面V基因的種系分布。

互補(bǔ)決定區(qū)(CDR)分析:抗體分子可分為恒定區(qū)和可變區(qū)兩部分。在可變區(qū)內(nèi)有一小部分氨基酸殘基變化特別強(qiáng)烈,

這個區(qū)域稱高變區(qū)(HVR)。在L鏈、H鏈的V區(qū)中有三個高變區(qū),該部位因在空間結(jié)構(gòu)上可與抗原決定簇形成精密的互補(bǔ),

又稱互補(bǔ)性決定區(qū)。

我們的優(yōu)勢

豐富的噬菌體抗體技術(shù)經(jīng)驗(yàn),五年以上噬菌體抗體開發(fā),交付上百個噬菌體展示抗體開發(fā)項目具有全人源重組抗體庫,庫容高達(dá)千億級別(1011pfu),兩步建庫法,保證了文庫的多樣性,抗體庫片段插入;正確率高;可以兩周拿到全人源重組抗體

可以構(gòu)建多物種(人源、小鼠、兔子、羊駝等)抗體文庫

可以構(gòu)建多種類型(scfv、FabVHH等)的抗體文庫


研究人員越來越多地使用抗體庫來尋找新的藥物靶點(diǎn)、抗體、疾病的生物標(biāo)志物等。隨著更多抗體的發(fā)現(xiàn)和更多的組合被納入其中,新藥和疫苗的開發(fā)將繼續(xù)顯示出改進(jìn)。

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