納米抗體(VHHs)是在駱駝科中表達(dá)的IgG2和IgG3的重鏈可變結(jié)構(gòu)域,缺乏CH1結(jié)構(gòu)域和輕鏈(圖1)。納米抗體(VHHs)是能夠保留原始全抗體的結(jié)合親和力和特異性的最小抗體片段(14 kDa),因其結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性和和廣泛的體外和體內(nèi)應(yīng)用而受到重視。對于傳統(tǒng)的IgGs (150 kDa),納米抗體(VHHs)的微小尺寸賦予了它與病毒的隱性表位結(jié)合的獨特能力,這一特性使其對生產(chǎn)適合病毒研究的試劑特別有用。
多年來,人們發(fā)現(xiàn)納米抗體(VHHs)是有效的晶體學(xué)伴侶和蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)表征的分子工具,是半衰期極短的放射性同位素的便捷載體,可用于體內(nèi)PET/SPECT成像,是納米顆粒、納米凝膠和生物傳感器可控和定向功能化的有效免疫試劑,如果提供合適的先導(dǎo)肽,它們甚至可以被哺乳動物細(xì)胞內(nèi)化。最近,它們的最小尺寸特別受到尋找適合優(yōu)化超分辨率顯微鏡性能的粘合劑的科學(xué)家的贊賞,并創(chuàng)建串聯(lián)嵌合抗原受體(CARs),由于可以同時結(jié)合多種抗原,CARs顯示出更高的目標(biāo)特異性。并且,納米抗體(VHHs)的短序列使它們成為最簡單的抗體衍生候選物,用于合理誘變和生物物理特征的計算機改進。在對納米體技術(shù)優(yōu)勢感興趣的同時,在限制其使用的專利到期后,對納米體的關(guān)注呈指數(shù)級增長。其結(jié)果是,最近許多新的團體探索了這一領(lǐng)域,并為其發(fā)展作出了貢獻。
據(jù)PubMed統(tǒng)計,20年前,納米體相關(guān)的出版物只有幾篇/年,到2010年,這一數(shù)字達(dá)到了幾十篇/年,到2019年,這一數(shù)字上升到了幾百篇/年。這意味著VHH的應(yīng)用范圍更廣,并且在從納米體分離到生產(chǎn)、工程和開發(fā)成成熟的免疫試劑的過程的任何步驟都衍生出新的替代方法。不同結(jié)構(gòu)構(gòu)型、結(jié)合選擇性和價態(tài)的納米體基試劑在效價、藥效和毒性等方面的優(yōu)缺點已被廣泛研究。一個典型的例子是ALX-0171,一種抗病毒治療的三聚體納米體。單域質(zhì)量的降低及其重組性質(zhì)使得三價試劑的生產(chǎn)更加簡單,其質(zhì)量明顯小于單價分子和商用人源化單克隆抗體帕麗珠單克隆抗體(Palvizumab),但具有更高的中和能力。目前,有大量的載體可用于在原核和真核系統(tǒng)中生產(chǎn)定制的納米抗體(VHHs),根據(jù)它們必須具有的功能特征來服務(wù)于它們的最終應(yīng)用。針對不同IgG表位的重組納米體最近已經(jīng)可用,為商業(yè)多克隆二抗提供了一種有效的克隆和簡單功能化的替代方案。