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不懂選購CD133抗體?這篇文章讓你瞬間掌握技巧!

發(fā)表時(shí)間:2024-09-29

CD133(也稱為PROM1)是一種細(xì)胞表面糖蛋白,廣泛應(yīng)用于干細(xì)胞和癌癥研究。作為常用的表面標(biāo)記物,它被用于識(shí)別具有干細(xì)胞樣特征的癌細(xì)胞,但其表達(dá)不僅限于腫瘤細(xì)胞,還存在于多種正常組織的分化細(xì)胞和干/祖細(xì)胞中。

 

CD133參與多種關(guān)鍵的細(xì)胞過程,例如在癌癥中經(jīng)常失調(diào)的信號(hào)通路:PI3K/Akt 和 Wnt/β-連環(huán)蛋白途徑。它的表達(dá)與癌癥應(yīng)激條件下增強(qiáng)的細(xì)胞自我更新、遷移、侵襲和存活密切相關(guān)。內(nèi)在和外在因素共同調(diào)節(jié)CD133的表達(dá),包括細(xì)胞本身的機(jī)制以及來自微環(huán)境的影響。細(xì)胞中增強(qiáng)的CD133表達(dá)通過特定信號(hào)通路的激活,能夠賦予適應(yīng)性優(yōu)勢,從而在癌癥發(fā)生、發(fā)展以及腫瘤耐藥性中起到重要作用。

 

Fig 1.The central role of CD133 in regulating various cellular processes within the microenvironment. 

 

CD133抗原表位與克隆號(hào)選擇

克隆號(hào)

識(shí)別表位

表位特征

應(yīng)用領(lǐng)域

適用場景

AC133

 CD133/1

糖基化表位,通常與干細(xì)胞表型密切相關(guān)

用于從外周血、骨髓、臍帶血及其他組織中分選CD133?細(xì)胞,廣泛應(yīng)用于干細(xì)胞、癌癥干細(xì)胞的流式細(xì)胞術(shù)(FACS)分析和磁珠分選(如MACS系統(tǒng))

適合分析或分選CD133?細(xì)胞,特別是在干細(xì)胞和癌癥干細(xì)胞的分選中表現(xiàn)優(yōu)異

293C3

 CD133/2

可能不具有糖基化修飾的表位

主要用于流式細(xì)胞術(shù)染色,特別是分選后用于熒光染色和細(xì)胞分型分析

在分選后的CD133?細(xì)胞檢測中應(yīng)用,提供較高的信號(hào)亮度和穩(wěn)定性

AC141

 CD133/2

可能不具有糖基化修飾的表位

與293C3類似,主要用于流式細(xì)胞術(shù)染色及分型分析

適合需要區(qū)分CD133/2表位的實(shí)驗(yàn),特別在特定癌癥細(xì)胞和干細(xì)胞亞群中表現(xiàn)良好

 

選擇CD133抗體克隆號(hào)時(shí)需要考慮的因素

  • 研究目的:如果目標(biāo)是分選CD133?細(xì)胞,尤其是從外周血或骨髓中分選時(shí),克隆AC133是優(yōu)選。其針對(duì)CD133/1糖基化表位的結(jié)合特性使其能夠在分選過程中提供更好的特異性。如果研究目的是在分選后對(duì)CD133?細(xì)胞進(jìn)行進(jìn)一步分析,如熒光染色和表型檢測,則可以選擇293C3或AC141來標(biāo)記CD133/2表位的細(xì)胞。

  • 疾病模型與表達(dá)差異:在某些疾?。ㄈ绻撬柙錾惓>C合征和某些急性髓性白血病)中,CD133/1和CD133/2的表達(dá)強(qiáng)度可能有所不同。例如,在某些白血病亞型中,CD133/1的表達(dá)可能較CD133/2更為顯著。這種表達(dá)差異可能受疾病狀態(tài)、微環(huán)境或治療策略的影響。因此,在針對(duì)這類模型的實(shí)驗(yàn)中,需要仔細(xì)評(píng)估兩種表位的表達(dá)水平,以選擇合適的抗體克隆號(hào)。

  • 表位特異性與結(jié)合特性:CD133的表位1(CD133/1)為糖基化表位,而表位2(CD133/2)可能不具有糖基化修飾。這種結(jié)構(gòu)上的差異可能導(dǎo)致兩種表位在不同細(xì)胞類型或疾病狀態(tài)下的抗體結(jié)合效果不同。表位1在糖基化程度高的細(xì)胞(如某些腫瘤干細(xì)胞)中更容易被識(shí)別,而表位2則更易在某些糖基化程度較低的細(xì)胞群中表現(xiàn)出良好的結(jié)合效果。因此,在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中應(yīng)綜合考慮細(xì)胞的表型特征和目標(biāo)表位的修飾情況,以確??贵w的最佳結(jié)合效果。

在選擇CD133抗體克隆號(hào)時(shí),應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)的具體需求和研究目標(biāo)來做出決策。AC133抗體因其識(shí)別CD133/1表位的特性,非常適合用于CD133?細(xì)胞的分選和流式分析;而293C3和AC141則因其識(shí)別CD133/2表位的特性,更適合用于分選后細(xì)胞的進(jìn)一步分析和染色。此外,在選擇抗體時(shí),還應(yīng)考慮特定疾病狀態(tài)下CD133兩個(gè)表位的表達(dá)水平差異,以及抗體與表位結(jié)合時(shí)可能受到的糖基化修飾影響。了解不同克隆號(hào)的表位特性和應(yīng)用場景,將有助于研究人員在實(shí)驗(yàn)中取得更精準(zhǔn)的結(jié)果。

 

CD133/PROM1抗體產(chǎn)品:

Catalog No

Product Name

RHA68402

Anti-Human Glycosylated CD133/PROM1 Antibody (AC133/1)

FHA68412

Anti-Human CD133/PROM1 Antibody (SAA0050), PE

FHA68422

Anti-Human CD133/PROM1 Antibody (SAA0409), PE

FHA68414

Anti-Human CD133/PROM1 Antibody (SAA0050), PerCP

FHA68424

Anti-Human CD133/PROM1 Antibody (SAA0409), PerCP

FHA68413

Anti-Human CD133/PROM1 Antibody (SAA0050), APC

FHA68423

Anti-Human CD133/PROM1 Antibody (SAA0409), APC

FHA68411

Anti-Human CD133/PROM1 Antibody (SAA0050), FITC

FHA68421

Anti-Human CD133/PROM1 Antibody (SAA0409), FITC

FHA68420

Anti-Human CD133/PROM1 Antibody (SAA0409)

FHA68410

Anti-Human CD133/PROM1 Antibody (SAA0050)

 

參考文獻(xiàn)

  • Yin AH, Miraglia S, Zanjani ED, Almeida-Porada G, Ogawa M, Leary AG, Olweus J, Kearney J, Buck DW. AC133, a novel marker for human hematopoietic stem and progenitor cells. Blood, 1997; 90(12): 5002-5012.
  • Uchida N, Buck DW, He D, Reitsma MJ, Masek M, Phan TV, Tsukamoto AS, Gage FH, Weissman IL. Direct isolation of human central nervous system stem cells. Proc Natl Acad Sci USA, 2000; 97(26): 14720-14725.
  • Miraglia S, Godfrey W, Yin AH, Atkins K, Warnke R, Holden JT, Bray RA, Waller EK, Buck DW. A novel five-transmembrane hematopoietic stem cell antigen: isolation, characterization, and molecular cloning. Proc Natl Acad Sci USA, 1997; 94(25): 14792-14797.
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